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厭氧菌的常規(guī)培養(yǎng)方法

發(fā)布日期: 2020-12-11
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           厭氧菌的常用培養(yǎng)方法

    厭氧菌培養(yǎng)是可以生長在沒有氧氣條件下的生物,有些厭氧菌可以在有氧氣條件下生產(chǎn),屬于兼性厭氧;有些甚至不能容忍微量氧氣的環(huán)境;屬于專性厭氧。厭氧菌是非常普通的;很多都是人體正常菌群的一部分,厭氧微生物轉(zhuǎn)地球生物群的50%;醫(yī)療系統(tǒng)感染中厭氧菌的檢出率至少在65%以上。厭氧菌屬于人體內(nèi)主要的正常菌群,在人體口腔、腸道、腫瘤、泌尿道較多梭形桿菌主要存在于上呼吸道和口腔;消化球菌和消化鏈球菌存在于腸道、口腔、陰道和皮膚;丙酸桿菌常存在于皮膚、上呼吸道和陰道;韋永氏球菌則存在于口腔、上呼吸道、陰道和腸道。根據(jù)醫(yī)院的資料,厭氧菌在腹部感染中的檢出率為62%,在闌尾膿腫、闌尾切除術(shù)后切口化膿中占77%。厭氧菌不僅可引起嚴重的胸腹部感染和膿腫,而且很多嚴重的軟組織壞死性感染幾乎都與厭氧菌有關(guān)。因此,厭氧菌的分離和鑒定在臨床診斷和科研是非常重要的。

 

常用培養(yǎng)方法

     厭氧手套箱(Anaerobic Chamber)是當前臨床、科研實驗室*合理培養(yǎng)厭氧菌的儀器越來越多的實驗室已經(jīng)意識到提高效率和節(jié)約成本必須從厭氧罐或厭氧袋轉(zhuǎn)移到厭氧培養(yǎng)箱。它不像一次性的厭氧袋或者厭氧罐,難免會將樣品暴露在空氣中;而厭氧培養(yǎng)箱的裸手袖套設(shè)計可自由處理樣品與嚴格的無氧環(huán)境,促使更快的樣品周轉(zhuǎn),并且從材料的拆機到接種、培養(yǎng)、檢查等一系列的基本操作流程均是在厭氧環(huán)境下完成。它給操作者提供了既能在箱體內(nèi)進行操作又能單獨進行培養(yǎng)的厭氧環(huán)境。

     厭氧培養(yǎng)箱采用連續(xù)焊接不銹鋼及有機玻璃密封而成,確保箱體的堅固耐用。有機玻璃可一覽無余的觀察箱體內(nèi)的工作區(qū)域,視野*。有機玻璃上裝有兩個橢圓形密封門以及袖套,可通過橡膠袖套在箱內(nèi)進行操作。操作流程:1、先將樣品傳遞室外門打開,把所需樣品放進傳遞室;關(guān)上傳遞室的同時空氣也會隨之進入到傳遞室。通過抽真空加入氣體的自動循環(huán)方式將傳遞室變?yōu)閰捬鯛顟B(tài)(真空壓力表可根據(jù)需求顯示以及設(shè)定數(shù)值)。2、將橡膠袖套也通過抽真空加入氣體的自動循環(huán)方式變?yōu)閰捬醐h(huán)境(真空壓力表可根據(jù)需求顯示和設(shè)定數(shù)值)。3、通過袖套打開密封門,手伸入操作室內(nèi)將樣品傳遞室內(nèi)門打開,取出需樣品放到操作室進行操作。4、操作臺內(nèi)部有電源插座,方便操作者用接種環(huán)為其菌落接種。5、把所需培養(yǎng)的培養(yǎng)皿或三角燒瓶放入操作室后背懸掛的培養(yǎng)室進行單獨培養(yǎng);良好的溫度控制有利于菌落的生長繁殖,后通過肉眼或者顯微鏡來觀察判斷厭氧菌的生長情況。

箱內(nèi)保持厭氧狀態(tài)的原理是將混合氣體填充進入箱體,混合氣體中的氫氣會與箱體中剩余的氧氣在鈀催化劑的作用下生產(chǎn)水的原理。該箱體有特點:微電腦控制系統(tǒng),通過指示燈顯示整個箱體的運行狀態(tài);樣品傳遞室及橡膠袖套分別單獨配有真空壓力表及排氧指示燈顯示獨立超溫保護系統(tǒng);操作室自動按鍵一次自動排氧達到厭氧環(huán)境;HEPA過濾器凈化過濾;內(nèi)置氣體壓力調(diào)節(jié)裝置等功能。均用來提升實驗結(jié)果的準確性和可靠性。保證厭氧培養(yǎng)箱給用戶提供一個嚴格的厭氧環(huán)境。為其后續(xù)的臨床或科研實驗提供有力的技術(shù)支持!

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